豚鼠白介素-2(IL-2)Elisa試劑盒實驗說明書

　　以下是天正信達豚鼠白介素-2(IL-2)ELISA試劑盒的實驗說明書摘要，綜合整理自多個來源：

　　一、實驗原理?

　　采用雙抗體夾心法檢測樣本中IL-2濃度。包被抗體與樣本中的IL-2結合后，依次加入生物素化抗體和HRP標記的鏈霉親和素，最終通過TMB顯色反應測定OD值，濃度與吸光度成正比。

　　二、試劑盒組成?

　　預包被微孔板?：96孔聚苯乙烯板(12孔×8條)

　　標準品?：凍干粉(2ng/瓶或160ng/L)，需用稀釋液重構

　　檢測試劑?：

　　酶標抗體工作液(HRP標記)

　　生物素化抗體工作液

　　輔助溶液?：

　　30×濃縮洗滌液(需1:20~1:30稀釋)

　　TMB顯色液(A/B液分裝)

　　終止液(硫酸溶液)

　　三、樣本處理?

　　樣本類型?：血清、血漿(EDTA/肝素抗凝)、細胞培養上清、組織勻漿

　　保存條件?：

　　短期：2-8℃保存48小時內檢測

　　長期：-20℃或-70℃凍存，避免反復凍融

　　四、標準品稀釋?

　　原倍標準品用1ml稀釋液重構(如2ng/ml)

　　梯度稀釋：

　　取8管，每管加稀釋液300μl

　　首管加入標準品后倍比稀釋，第7管棄去300μl，第8管為空白對照

　　五、實驗步驟?

　　加樣?：

　　標準品/樣本每孔100μl，37℃孵育120分鐘

　　洗滌?：棄液后加洗滌液，重復4-6次，拍干

　　抗體孵育?：

　　加生物素化抗體100μl，37℃ 60分鐘

　　洗板后加酶標試劑50μl，37℃ 30分鐘

　　顯色與終止?：

　　加TMB 100μl，避光反應15分鐘

　　加終止液50μl，15分鐘內測450nm OD值

　　六、注意事項?

　　溫度控制?：所有試劑使用前需平衡至室溫(20-25℃)

　　避免污染?：

　　不同試劑避免交叉污染

　　勿使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)

　　數據計算?：以標準曲線擬合濃度，乘以稀釋倍數

　　七、儲存與有效期?

　　未開封試劑盒：2-8℃保存，有效期6個月

　　開封后：微孔板需密封防潮，部分試劑需-20℃保存

　　如需完整說明書，請聯系供應商獲取。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實際標準，具體請咨詢技術老師。

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