如何選擇合適的PVDF膜和NC膜?
以下是天津本生對(duì)PVDF膜與NC膜的選擇指南,綜合分子量、實(shí)驗(yàn)需求及操作特性進(jìn)行對(duì)比分析:
一、?核心選擇標(biāo)準(zhǔn)?
參數(shù)? ?PVDF膜? ?NC膜?
蛋白結(jié)合力? 更強(qiáng)(100-200μg/cm2) 較弱(80-150μg/cm2)
機(jī)械強(qiáng)度? 高,可反復(fù)使用 脆,易破損
預(yù)處理? 需甲醇活化 僅需緩沖液浸潤(rùn)
適用分子量? 0.45μm(>20kDa),0.22μm(<20kDa) 0.45μm(>20kDa),0.2μm(<20kDa)
二、?按實(shí)驗(yàn)需求選擇?
優(yōu)先選PVDF膜的情況?
高靈敏度檢測(cè)?:低豐度蛋白或小分子蛋白(<20kDa);
多次檢測(cè)?:需剝離重孵育或化學(xué)染色;
糖蛋白分析?:結(jié)合力優(yōu)于NC膜。
優(yōu)先選NC膜的情況?
快速操作?:無(wú)需甲醇活化,節(jié)省時(shí)間;
低背景要求?:化學(xué)發(fā)光檢測(cè)時(shí)信噪比更高;
成本敏感?:價(jià)格更低且保質(zhì)期長(zhǎng)。
三、?特殊場(chǎng)景注意事項(xiàng)?
熒光檢測(cè)?:避免PVDF膜(背景高),推薦NC膜;
高分子量蛋白?(>100kDa):PVDF膜結(jié)合更牢固;
多次洗滌?:PVDF膜耐化學(xué)性更強(qiáng)。
四、?操作優(yōu)化建議?
PVDF膜預(yù)處理?:甲醇浸泡30秒后緩沖液平衡;
NC膜封閉?:使用0.3% Tween-20避免蛋白洗脫;
轉(zhuǎn)印條件?:小蛋白(<30kDa)建議0.22μm膜+低溫轉(zhuǎn)印。
根據(jù)目標(biāo)蛋白特性、檢測(cè)方法及實(shí)驗(yàn)流程綜合選擇,可參考廠商規(guī)格。
注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn),具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。
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