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如何判斷ELISA試劑是否選擇正確?

更新時間:2025-10-28  |  點擊率:434
  如何判斷ELISA試劑是否選擇正確?
 
  一、種屬匹配性驗證
 
  樣本來源確認‌:需嚴格匹配試劑盒種屬(如人、小鼠、犬等),跨種屬檢測會導致假陰性‌。例如,犬α干擾素檢測必須選擇犬專用試劑盒,不可用人或小鼠試劑盒替代^[用戶個性化信息]^。
 
  交叉反應測試‌:通過預實驗驗證抗體是否與其他類似分子(如犬干擾素β)發生交叉反應,特異性差的試劑盒會產生假陽性‌。
 
  二、性能參數評估
 
  靈敏度與檢測范圍‌:
 
  高靈敏度試劑盒(檢測限≤1 pg/mL)適用于低表達樣本(如健康犬血清)‌
 
  寬范圍試劑盒(如10-2000 pg/mL)適合高濃度樣本(炎癥模型)‌
 
  回收率與線性‌:加標回收率應在80%-120%之間,稀釋線性R²需≥0.98‌
 
  三、樣本兼容性測試
 
  基質效應排查‌:
 
  雞沙門氏菌抗體檢測需驗證溶血樣本(血紅蛋白干擾)和抗凝劑(EDTA/肝素)影響‌
 
  細胞上清樣本需確認無FBS殘留干擾‌
 
  預實驗必要性‌:通過3-5個樣本梯度稀釋驗證OD值是否落在標準曲線線性區間‌
 
  四、質量控制指標
 
  批間精密度‌:板內CV應<10%,板間CV<15%‌
 
  穩定性驗證‌:試劑盒在4℃/25℃存放7天后,信號衰減應<20%‌
 
  五、文獻與供應商評估
 
  文獻引用‌:優先選擇被SCI論文驗證的試劑盒(如犬干擾素檢測引用≥5篇文獻)‌
 
  資質審查‌:要求供應商提供完整質控報告(含交叉反應、干擾實驗數據)‌
 
  通過上述系統性驗證,可確保ELISA試劑選擇的準確性。若出現異常結果(如標準曲線非線性),需優先排查種屬匹配性和樣本基質干擾‌。
 
  注意:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
 
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