如何避免ELISA實驗中的樣本污染?
在ELISA實驗中避免樣本污染需從樣本處理、操作規范及環境控制三方面綜合防控:
一、樣本處理規范
避免溶血與細菌污染?
溶血樣本中的血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,易導致假陽性;細菌污染可能降解酶標物或產生干擾酶?。建議采集后立即離心分離血清,避免反復凍融破壞蛋白結構?。
樣本保存與稀釋?
短期保存需2-8℃,長期應-70℃以下,使用前室溫平衡30分鐘?。稀釋時需使用同一移液器和槍頭,避免交叉污染?。
二、操作流程控制
分區操作與耗材管理?
嚴格劃分樣本制備區、加樣區、孵育區,使用物理屏障隔離?。酶標物需分裝保存,避免反復開瓶污染?。
加樣與洗滌規范?
加樣需垂直操作,避免液體飛濺;每份樣本更換槍頭,定期校準移液器?。洗滌時確保洗液注滿孔位,拍板力度適中,避免殘留?。
三、環境與儀器管理
溫育與顯色控制?
孵育溫度需穩定在37℃,顯色時間嚴格按說明書控制,避光操作以減少非特異性顯色?。
儀器維護?
定期檢查洗板機管道是否堵塞,酶標儀濾光片需清潔,避免負值干擾。高滴度樣本檢測后需清潔儀器?。
通過上述措施可有效降低ELISA實驗中的樣本污染風險,確保結果準確性?。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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