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大鼠ELISA試劑盒加樣實(shí)驗(yàn)常見問題解答

更新時(shí)間:2025-06-20  |  點(diǎn)擊率:758
  標(biāo)簽:Elisa 本生試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)品 抗體 封板膜 一次性吸頭 大鼠試劑盒
 
  以下是天正信達(dá)關(guān)于大鼠ELISA試劑盒加樣實(shí)驗(yàn)常見問題的解答及解決方案:
 
  一、加樣不準(zhǔn)確問題‌
 
  移液器校準(zhǔn)不當(dāng)‌
 
  需定期用標(biāo)準(zhǔn)砝碼校準(zhǔn)移液器,特別是小體積加樣(如5-10μL)。
 
  加樣時(shí)吸頭需垂直插入液體,緩慢勻速操作,避免氣泡產(chǎn)生。
 
  加樣時(shí)間過長(zhǎng)‌
 
  單次加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),樣本較多時(shí)分批操作。
 
  使用多道移液器可提高效率,減少孔間差異。
 
  液體殘留或?yàn)R灑‌
 
  加樣后檢查孔壁是否殘留液體,用吸水紙輕拭酶標(biāo)板表面。
 
  加酶試劑時(shí)避免快速操作,防止液體濺出孔外。
 
  二、樣本處理問題‌
 
  血清/血漿樣本‌
 
  血清需靜置1-2小時(shí)后離心(3000rpm,15分鐘);血漿需采血后立即混勻抗凝劑再離心。
 
  溶血或脂血樣本需離心后取上清,避免血紅蛋白干擾。
 
  樣本保存不當(dāng)‌
 
  短期存放于2-8℃,長(zhǎng)期保存需-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
 
  三、實(shí)驗(yàn)操作問題‌
 
  孵育條件不穩(wěn)定‌
 
  溫育時(shí)使用恒溫箱(37℃±0.5℃),避免溫度波動(dòng)。
 
  封板膜需一次性使用,防止蒸發(fā)和污染。
 
  洗滌不凈‌
 
  每孔注滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)4-6次,最后拍干。
 
  自動(dòng)洗板機(jī)需檢查管路是否堵塞。
 
  顯色異常‌
 
  TMB顯色需避光,反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘,及時(shí)終止。
 
  若顯色過弱,檢查酶標(biāo)抗體活性或延長(zhǎng)孵育時(shí)間。
 
  四、質(zhì)量控制建議‌
 
  設(shè)置對(duì)照‌
 
  必須包含空白孔、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性。
 
  重復(fù)性差處理‌
 
  復(fù)孔加樣需使用同一移液器,保持操作一致性。
 
  板內(nèi)變異系數(shù)應(yīng)<15%,否則需排查加樣或洗滌問題。
 
  五、其他注意事項(xiàng)‌
 
  試劑污染‌:避免使用含NaN3的緩沖液(抑制HRP活性)。
 
  環(huán)境控制‌:操作臺(tái)需清潔,移液器吸頭一次性使用。
 
  具體問題可結(jié)合試劑盒說明書調(diào)整。
 
  注:以上資料僅供參考,不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn),具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。
 
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