天正信達ELISA試劑盒實驗中洗滌注意事項

　　以下是天正信達ELISA試劑盒實驗中洗滌操作的注意事項，綜合關鍵步驟與優化建議：

　　一、洗滌液配置與選擇

　　緩沖液配制‌

　　使用pH 7.2-7.4的PBST(含0.05%-0.2% Tween-20)，避免濃度過高導致包被物解吸附。

　　若樣本含金屬離子干擾，可添加1-5mM EDTA增強洗滌效果。

　　溫度控制‌

　　洗液需預熱至20-30℃，低溫易導致“花板”現象(非特異性殘留)。

　　二、手工洗滌操作要點

　　浸泡式洗滌‌

　　每孔注滿200-300μL洗液，靜置1-2分鐘并間歇搖動，重復3-4次。

　　拍干時垂直扣板，避免左右甩動導致交叉污染。

　　流水沖洗式‌

　　適用于微量滴定板，水流沖擊孔表面2分鐘可提升洗滌效率。

　　三、洗板機使用規范

　　參數設置‌

　　洗滌量需略超包被體積(如350μL/孔)，吸液高度調至距孔底0.5-1mm以減少殘留。

　　推薦3次循環洗滌，過度洗滌可能降低信號強度。

　　維護檢查‌

　　每日校準注液量，殘液量需≤2μL，及時更換堵塞吸頭。

　　四、常見問題處理

　　現象‌ ‌原因‌ ‌解決方案‌

　　高背景信號‌ 洗滌不或交叉污染 增加洗滌次數至5-6次，優化拍干動作

　　孔間差異大‌ 洗板機吸液不均 檢查吸頭是否堵塞，調整抽吸位置居中

　　板底殘留水漬‌ 拍干不或濾紙掉屑 使用無塵吸水紙，最后一次拍干加強力度

　　五、天正信達特別提示

　　封閉后洗滌‌：使用5% BSA封閉后，需PBST洗滌3次以去除非結合蛋白。

　　顯色前處理‌：最后一次洗滌后需拍干，避免殘留液體稀釋底物。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實際標準，具體請咨詢技術老師。

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