如何做到快速高效?這份優(yōu)選指南幫你迅速做出決定!
DNA提取是進行測序、PCR等實驗的關(guān)鍵步驟。選擇合適的提取方法至關(guān)重要。物理法,如研磨法、超聲波法、凍融法,通過物理手段破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)釋放DNA,操作簡單但可能引入污染?;瘜W(xué)法,如酚/氯仿提取法、鹽提取法、異硫氰酸胍法,利用化學(xué)試劑去除雜質(zhì),提取效率高但操作繁瑣。此外,商業(yè)化DNA提取試劑盒,如磁珠法、硅膠柱法,簡化了提取過程,適用于大規(guī)模樣本處理。新技術(shù)如微流控芯片技術(shù)、納米材料技術(shù)、自動化提取設(shè)備,在提高提取效率和純度方面展現(xiàn)出巨大潛力。選擇時,需考慮樣本類型、實驗需求、成本預(yù)算等因素。避免核酸酶污染,確保樣品新鮮,嚴(yán)格按照協(xié)議操作,以提高提取效率和質(zhì)量。
以下是DNA提取方法優(yōu)選指南,綜合不同樣本類型、提取效率及下游應(yīng)用需求,助您快速決策:
一、核心提取方法對比
方法 適用樣本 得率(μg/mL) 純度(OD260/280) 耗時 下游應(yīng)用
硅膠膜吸附法 血液、細(xì)胞、組織 15-42 1.7-1.9 30分鐘 PCR、測序
磁珠法 微量樣本(如FFPE、唾液) 10-30 1.8-2.0 20分鐘 高通量測序、qPCR
CTAB法 植物、真菌 5-20 1.6-1.8 2小時 酶切、克隆
SDS法 動物組織、細(xì)菌 10-25 1.5-1.7 3小時 基因組分析
二、按樣本類型推薦
血液/細(xì)胞樣本
選擇:硅膠膜吸附法(如Qiagen試劑盒),得率穩(wěn)定且操作標(biāo)準(zhǔn)化
替代:磁珠法(適合自動化處理,但成本較高)
植物樣本
CTAB法:含多糖/多酚的植物組織需結(jié)合PVP去除雜質(zhì)
快速方案:商用植物DNA提取試劑盒(如Yeasen品牌)
復(fù)雜樣本(如土壤、糞便)
復(fù)合裂解:物理研磨+SDS/蛋白酶K聯(lián)合處理
三、純度與完整性控制
純度優(yōu)化
低OD260/280(<1.6):增加蛋白酶K消化時間或乙醇洗滌
高OD260/280(>1.9):加入DNase-free RNase去除RNA
完整性檢測
電泳:清晰23kb條帶(基因組DNA)
qPCR:檢測短片段擴增效率(適用于FFPE樣本)
四、品牌與試劑盒選擇
高性價比:Starvio血液DNA試劑盒(得率11-42μg/mL)
高靈敏度:Qiagen磁珠法試劑盒(1ng起始量)
特殊需求:Yeasen植物DNA快速提取盒(含多糖清除劑)
五、常見問題解決
低得率:增加樣本量或更換裂解液(如升級為含SDS的裂解體系)
多糖污染:CTAB法結(jié)合氯仿/異戊醇抽提
自動化需求:選擇96孔板磁珠提取系統(tǒng)
根據(jù)實驗?zāi)繕?biāo)和資源靈活選擇方法,如需具體操作細(xì)節(jié)可進一步說明樣本類型及設(shè)備條件。
天津天正信達(dá)供應(yīng):RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實驗耗材,我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實驗技術(shù)平臺,主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機、全波長酶標(biāo)儀、高速落地離心機和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。
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