小麥醇溶蛋白ELISA試劑盒如何正確使用?了解其組分是關(guān)鍵

　　小麥醇溶蛋白ELISA試劑盒包含微孔酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、樣本稀釋液、檢測抗體-HRP、洗滌緩沖液、底物A、B及終止液等。使用時，先取出室溫平衡后的板條，剩余密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入50μL不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本孔先加10μL待測樣本，再加40μL樣本稀釋液。按說明書操作，依次加入各組分，注意加樣準(zhǔn)確，避免交叉污染。洗滌時去除殘留物。最后，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度，根據(jù)OD值計算樣品中小麥醇溶蛋白濃度。嚴(yán)格遵循操作指南，確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　TZXD-5040   小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒   96T/48T

　　以下是小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒的正確使用方法和組分關(guān)鍵說明：

　　一、核心組分識別與準(zhǔn)備

　　酶標(biāo)包被板‌

　　含預(yù)包被Gliadin抗體，使用前需室溫平衡30分鐘‌

　　未用完板條應(yīng)立即密封放回4℃保存‌

　　標(biāo)準(zhǔn)品(16μg/mL)‌

　　需用稀釋液梯度稀釋至0.2-9μg/mL濃度‌

　　現(xiàn)配現(xiàn)用，剩余標(biāo)準(zhǔn)品不可重復(fù)使用‌

　　顯色系統(tǒng)‌

　　顯色劑A/B需避光保存，按1:1比例現(xiàn)混現(xiàn)用‌

　　終止液含強酸，操作需戴防護裝備‌

　　30×洗滌液‌

　　使用前需用蒸餾水稀釋至1×工作濃度‌

　　低溫儲存時若有結(jié)晶，需37℃水浴溶解‌

　　二、標(biāo)準(zhǔn)操作流程

　　樣本處理‌

　　血清/血漿需2000-3000×g離心20分鐘‌

　　組織樣本按1:5比例生理鹽水勻漿‌

　　加樣步驟‌

　　孔類型 操作要求

　　空白孔 僅加稀釋液‌

　　標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL梯度標(biāo)準(zhǔn)品‌

　　樣本孔 先加40μL稀釋液，再加10μL樣本‌

　　溫育條件‌

　　37℃孵育30分鐘，避免疊放板條‌

　　使用封板膜防止蒸發(fā)‌

　　洗滌規(guī)范‌

　　手工洗板需拍干5次，每次靜置30秒‌

　　洗板機需檢查噴頭通暢性‌

　　顯色終止‌

　　避光反應(yīng)10分鐘(顯藍色)‌

　　終止后15分鐘內(nèi)完成450nm讀數(shù)‌

　　三、關(guān)鍵注意事項

　　質(zhì)量控制‌

　　標(biāo)準(zhǔn)品需做復(fù)孔(CV<15%)‌

　　樣本OD值應(yīng)落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)‌

　　安全規(guī)范‌

　　不同批次試劑禁止混用‌

　　所有廢棄物按生物污染處理‌

　　數(shù)據(jù)驗證‌

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線R²需>0.99‌

　　超標(biāo)樣本需稀釋后復(fù)測‌

　　(注：具體操作請以實際試劑盒說明書為準(zhǔn)‌)

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